《你问我答》栏目搜集了华大智造客户的常问问题,并为大家整理出了不同产品的FAQ,后续将陆续发布,帮助您更好地了解和使用我们的产品。
文章导览:
Q1:MGIEsay 组织保存液可以适用于哪些应用?
Q2:MGIEasy 组织保存液推荐保存的组织样本大小?
Q3:MGIEasy 组织保存液可以用于储存单细胞吗?
Q4:如果无法在72h内完成组织解离等实验,需要怎么做?
Q5:什么类型的单细胞测序应用需要MGIEasy 组织保存液?
Q6: 如何用MGIEasy 组织保存液保存组织?
Q1:MGIEsay 组织保存液可以适用于哪些应用?
主要推荐单细胞测序,尤其是关注细胞的基因表达、蛋白表达、抗原表位研究的单细胞 RNA 测序。
Q2:MGIEasy 组织保存液推荐保存的组织样本大小?
组织样本建议切成不超过0.3cm x 0.3cm的小块,根据不同组织可适当调整,最大不超过0.5cm x 0.5cm的大小。
Q3:MGIEasy 组织保存液可以用于储存单细胞吗?
目前不建议储存单细胞,从原理上组织保存液对细胞具有一定的保存能力,但目前缺乏充足的实验数据证实对不同细胞的保存效果,建议使用专门的细胞保存液。
Q4:如果无法在72h内完成组织解离等实验,需要怎么做?
如果超过72h,推荐直接使用液氮速冻整个组织。不过这种处理方法,复苏时容易造成细胞破损,可能已经无法满足单细胞 RNA 测序的需求,更适用单细胞核测序。请根据实际项目需求,来选择应用方案。
Q5:什么类型的单细胞测序应用需要MGIEasy 组织保存液?
单细胞测序,尤其是需要研究基因表达、蛋白表达、抗原表位的单细胞 RNA 测序,需要实验的时候保留完整的细胞形态和活性。新鲜的组织一旦离体,如果无法立即对组织进行单细胞后续实验,组织的细胞状态短时间内就会发生变化甚至发生死亡,并在裂解后向周围环境释放,造成检测中的背景噪音,从而影响单细胞数据质量。
因此,新鲜组织离体的时候,如果不能马上进行后续实验,需要马上使用 MGIEasy 组织保存液进行保存和运输。
Q6: 如何用MGIEasy 组织保存液保存组织?
操作步骤如下:
1. 在生物安全柜中,准备一个合适大小的一次性无菌培养皿,置于冰上,加入少量预冷至2 ℃~8 ℃的细胞培养基,如 DMEM。
2. 采集新鲜的组织样本,并迅速置于冰上的培养皿中。
3. 用镊子轻柔晃动组织,用培养基简单地清洗组织。
4. 准备一个新的一次性无菌培养皿并加入培养基,将培养皿置于冰上。用镊子将清洗完的组织转移至该培养皿。
5. 用手术刀片快速将组织切成不超过0.3cm x 0.3 cm的小块,用培养皿中的培养基清洗切好的组织,去掉血液,肌肉组织等杂质,再转移到组织保存液中进行保存。
提示:保存液与保存的组织的体积比应大于10:1。建议10mL保存液保存不超过4~5块0.3cm x 0.3cm的组织块,约100mg。保存液过少可能会导致局部组织细胞缺乏保护。
6. 将保存液保存的组织放置于2 ℃~8 ℃保存或运输,保存或运输的总时间不超过72小时。
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